声明

本文是学习GB-T 34733-2017 海水鱼类刺激隐核虫病诊断规程. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们

1 范围

本标准给出了海水鱼类刺激隐核虫病的流行情况与主要症状,规定了海水鱼类刺激隐核虫病诊断

的样品采集与处理、诊断、病原体确认和结果判定的方法和要求。

本标准适用于海水鱼类刺激隐核虫病的诊断、流行病学调查、检疫与监测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

SC/T 7014—2006 水生动物检疫实验技术规范

SC/T 7103—2008 水生动物产地检疫采样技术规范

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

刺激隐核虫病 cryptocaryonosis

海水养殖鱼类受刺激隐核虫感染,发生病理变化并出现行为异常或死亡的一种疾病。

4 试剂与器材

4.1 海水:1.05 kg/cm²,121.3℃ 高压蒸汽灭菌15 min。

4.2 0.85%的生理盐水。

4.3 蒸馏水。

4.4 固定液:4%甲醛或70%乙醇。

4.5 Giemsa 染色液。

4.6 光学显微镜、解剖镜和放大镜(30×)。

4.7 解剖盘、手术剪、眼科镊、解剖刀、解剖针、吸管。

4.8 载玻片、盖玻片、培养皿。

4.9 标签纸、记号笔。

5 流行情况与主要症状

5.1 流行情况

几乎在所有海水养殖鱼类中都可发生,主要危害大黄鱼、卵形鲳修、石斑鱼、真鲷、斜带髭鲷和娩鱼
等,对苗种造成的危害大于成鱼。水温10℃~30℃均可发生,发病时间主要为5月下旬~7月中旬(水

温约为22℃~28℃)和9月中旬~11月下旬(水温约为25℃~19℃)。

GB/T 34733—2017

5.2 主要症状

病鱼游动迟缓,对外界刺激反应迟钝,呼吸困难,摄食量减少;病情严重时,病鱼离群于水面缓慢游
动,不摄食。体表、眼角膜、口腔周围和鳃可观察到白点,体表、鳍、鳃黏液增生形成白色混浊状薄膜,病

情严重时体表出现点状出血。

6 样品采集与处理

6.1 采样

从养殖网箱或池塘中采集具有临床症状的鱼体10尾以上,其余按 SC/T
7014—2006 第6章的规

定执行。

6.2 样品封存、运输、登记与保存

按 SC/T 7103—2008第9章、第10章、第11章和第12章的规定执行。

7 临床诊断

7.1 制样

解剖镜或放大镜观察鱼体体表及鳍条,刮取病鱼体表部分黏液,剪取部分鳍和左右鳃的鳃丝,置于

清洁载玻片上,加适量生理盐水或蒸馏水,制作水封片,各组织制作两个以上样片。

7.2 显微检查

在10×10的低倍镜下参照附录A 检查水封片上的虫体形态与数量。

8 病原体确认

刮取体表黏液或取鳍条及鳃,或将虫黏液涂片体用4%甲醛或70%乙醇固定过夜,常温干燥后,

Giemsa 染液染色30 s,蒸馏水冲洗,常温干燥,显微镜观察虫体形态,对照附录
A 确认。

9 结果判定

检测样品流行情况和主要症状与第5章描述相符,显微检查观察到虫体,虫体确认为刺激隐核虫,

即可诊断患刺激隐核虫病。

style="width:4.54677in;height:3.4133in" />GB/T 34733—2017

A

(资料性附录)

刺激隐核虫的形态与生活史

A.1 形态

刺激隐核虫的滋养体呈球形或卵形,个体大小为(0.066 mm~0.45 mm)×(0.034
mm~0.36 mm)。
全身被有纤毛,前端有一胞口。有4个~8个(一般4个)卵圆形的核质,相连呈念珠状,作"U"
形排列成

大核。显微镜下虫体的表膜较厚,虫体细胞质较浓密,内有许多颗粒,透明度低,大核一般不易看清。

A.2 生活史

刺激隐核虫发育为4个阶段:营养期(feeding stage)、休眠期(resting
stage)、分裂期(dividing stage)和感染期(infecting stage)。
鱼体皮肤和鳃皮层中生长发育的是滋养体(trophont), 滋养体成熟
后从鱼体脱落到水中自由游动一短暂时期,后附着在固着物上,形成包囊(tomont),
即进入休眠期。水
温等环境适合时,包囊内的原生质细胞经历一系列分裂(分裂期),形成幼体(tomite)。
幼体成熟后逸出
包囊进入水中,即为具有感染能力的幼虫(theront),幼虫一旦遇到宿主,即侵入皮肤和鳃,发育成滋养
体。刺激隐核虫发育各阶段形态与患刺激隐核虫病的大黄鱼如图 A.1
所示;刺激隐核虫生活史如图 A.2

所示。

style="width:4.45993in;height:3.42012in" />

a) 滋养体 b) 包囊

A.1 刺激隐核虫发育各阶段形态与患刺激隐核虫病的大黄鱼

style="width:4.2867in;height:4.16658in" />GB/T 34733—2017

style="width:4.58658in;height:4.11334in" />

c) 包囊中幼虫

style="width:0.58654in;height:0.57236in" />

d) 逸出幼虫

style="width:7.55987in;height:3.15986in" />

e) 患刺激隐核虫病的大黄鱼

A.1 ( 续 )

GB/ T 34733—2017

style="width:9.08663in;height:7.01338in" />

说明:

1——宿主鱼;

2——滋养体;

3——包囊初期,细胞质内出现许多液泡,大核膨大,小核明显;

4——大核盘曲,小核多个,包囊壁分3层,中层波状;

5 — 分裂成大小两个细胞;

6——小细胞继续分裂;

7——分裂成许多纤毛幼虫;

8—— 自包囊出来的纤毛幼虫感染鱼体。 注: 3~7所示为包囊期。

A.2 刺激隐核虫生活史(仿孟庆显)

延伸阅读

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